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pH控制是如何持續穩定的在酶催化反應中運用的
2024-11-29   思辰儀器    1371

酶催化的特點(diǎn)更加符合現代化社會(huì )對于綠色、環(huán)保的要求,酶催化具有高效性、專(zhuān)一性和溫和性。然而,由于大多數的酶是蛋白質(zhì),對于溫度、pH值等條件十分敏感,容易變質(zhì)導致酶失活,因此酶催化的反應對于pH控制精度、靈敏度要求較高。以下是對綠色、高效的酶催化反應的pH控制的詳細分析

一、pH對酶催化反應的影響

影響酶活性:酶在最適pH范圍內表現出活性,大于或小于最適pH,都會(huì )降低酶的活性。這主要表現在兩個(gè)方面:一是改變底物分子和酶分子的帶電狀態(tài),從而影響酶和底物的結合;二是過(guò)高或過(guò)低的pH都會(huì )影響酶的穩定性,進(jìn)而使酶遭受不可逆破壞。

影響反應收率:許多酶催化反應最后收率不高,可能都是隨著(zhù)反應進(jìn)行,體系的pH值發(fā)生變化而未及時(shí)糾正導致。

影響產(chǎn)物構型:有些酶催化后的產(chǎn)物甚至只有單一的構型,如果pH控制不當,可能導致生成外消旋產(chǎn)物或其他非目標產(chǎn)物。

二、pH控制方法

緩沖液法:傳統的pH控制方法是配制緩沖液,使反應體系的pH值穩定在一定范圍內。然而,緩沖溶液存在有效緩沖范圍,并且大量緩沖溶液和反應體系存在一定的離子效應。

pH自動(dòng)控制加液系統:該系統能夠實(shí)時(shí)檢測反應體系的pH值,并根據設定的目標pH值自動(dòng)調整加酸或加堿的量,從而確保反應體系的pH值始終維持在設定范圍內。這種方法具有精度高、穩定性好、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。例如,SC-100A pH自動(dòng)控制加液系統就是一款集pH值實(shí)時(shí)在線(xiàn)或靜態(tài)控制、測量與自動(dòng)加酸、加堿調整于一體的新型自動(dòng)化控制設備。它廣泛應用于高等院校、科研院所實(shí)驗室、中試車(chē)間以及工業(yè)生產(chǎn)流程中特定pH溶液的配制和調節。

三、應用實(shí)例

在實(shí)驗室重現的文獻實(shí)例中,反應是3,5-二羰基己酸叔丁酯被選擇性地還原為(R)-3-羰基-5-羥基己酸叔丁酯。該酶催化反應體系會(huì )變得越來(lái)越酸,隨著(zhù)反應的進(jìn)行,體系內pH會(huì )不斷下降。如果不及時(shí)中和掉生成的酸,可能會(huì )引起酶的失活,導致反應無(wú)法繼續進(jìn)行,或者反應物繼續反應但生成外消旋產(chǎn)物。采用pH自動(dòng)控制加液系統(如EasyMax & SevenExcellence組合)可以實(shí)現實(shí)時(shí)pH反饋控制。在全自動(dòng)加料泵中加入5%的氫氧化鈉水溶液,設定目標pH值為6.9。體系開(kāi)始反應后,pH一旦低于預設值6.9,便會(huì )根據pH變化速率自動(dòng)滴加適量的堿來(lái)中和生成的酸。結果表明,pH值一直被有效地控制在6.85~6.95之間,保障了酶的有效催化活性以及酶催化反應的順利進(jìn)行。

綜上所述,綠色、高效的酶催化反應需要精確的pH控制。通過(guò)采用先進(jìn)的pH自動(dòng)控制加液系統可以實(shí)現對反應體系pH值的實(shí)時(shí)監測和精確控制,從而確保酶催化反應的順利進(jìn)行并提高產(chǎn)物的質(zhì)量和收率。


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